如何提高 RT-PCR 反應的靈敏度與特異性

1.首先確定模板 RNA 完整性好，無 DNA 污染。

2.RNA 模板中不應含有擴增反應抑制劑。

3.為了防止模板降解，在反應體系中加入 RNase 抑制劑 RNasin。

4.使用適量的模板 RNA，模板量太多會降低特異性，太少會導致擴增不出條帶或條帶太弱。

5.若模板中有二級結(jié)構(gòu)，可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應溫度來提高擴增效果。

6.設計引物時，避免在引物 3’端含有互補序列，避免形成內(nèi)部發(fā)卡結(jié)構(gòu)。

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術(shù)實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應線，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務。